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1    一種窄分子量分布高脫乙酰度的殼寡糖的制備方法  

采用鹽酸、硫酸和醋酸制得混合酸，在混合酸和高溫條件下蝦蟹殼中的甲殼素大分子鏈能夠斷裂，尤其是連接單體的醚鍵。由于本發(fā)明采用混合酸和高溫進(jìn)行反應，反應過(guò)程較為劇烈，本發(fā)明中加入以丁二醇、異丙醇和正辛醇組成的多元醇能夠緩解反應的劇烈發(fā)生，同時(shí)提高產(chǎn)物分子量的窄分布，本發(fā)明制得的殼寡糖分子量分布指數為1.005?1.15，脫乙酰度為93?99％。

2    殼聚糖酶OUC-CsnA4-S49I及其應用和制備殼寡糖的方法

所述殼聚糖酶OUC?CsnA4?S49I的氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示。所述殼聚糖酶OUC?CsnA4?S49I在制備殼寡糖中的應用，所述殼寡糖的聚合度為2～5。所述制備殼寡糖的方法，以殼聚糖酶OUC?CsnA4?S49I降解殼聚糖得到殼寡糖，殼寡糖的聚合度為2～5。本發(fā)明的殼聚糖酶OUC?CsnA4?S49I具有產(chǎn)物特異性，降解殼聚糖可得到高聚合度的殼寡糖。本發(fā)明拓寬了GH 46家族的殼聚糖酶酶解殼聚糖的產(chǎn)物譜，可用于制備高聚合度的殼寡糖，應用潛力巨大，應用前景廣闊。

3    迷迭香酸改性殼寡糖及其制備方法與應用

制備出了一種迷迭香改性殼寡糖(COS?RA)，該化合物具有遠高于天然殼寡糖的抗氧化活性，對果實(shí)中的花青素具有顯著(zhù)的提高作用，進(jìn)而促進(jìn)果實(shí)著(zhù)色。將其制成水溶制劑對果實(shí)噴施后，果實(shí)的總花青素含量提高40.2％～54.5％，其中各種單體花青素的含量都有顯著(zhù)地提升。與天然殼寡糖相比，該化合物在促進(jìn)果實(shí)著(zhù)色的應用中效果更好，用量更小，著(zhù)色更均勻，成熟期間花青素含量累積更高，且同樣具備殼寡糖的無(wú)毒、易生物降解等特性，因而具有更好的田間應用效果，可廣泛應用于農業(yè)生產(chǎn)領(lǐng)域中。

4    低分子量殼寡糖的提取工藝 

先將短柄帚霉?紅球菌發(fā)酵物、木瓜蛋白酶、纖維素酶混合制成復合酶，接著(zhù)將復合酶利用N?琥珀酰殼聚糖為載體，經(jīng)N，N’?亞甲基雙丙烯酰胺交聯(lián)，得到酶制劑；再將螃蟹殼粉碎成螃蟹殼粉，接著(zhù)將螃蟹殼粉與玉米漿混合得到混合料，滅菌，向混合料中接入復合菌，在高頻交變磁場(chǎng)條件下發(fā)酵，得到發(fā)酵產(chǎn)物；然后將發(fā)酵產(chǎn)物進(jìn)行電解處理，加入酶制劑，酶解，滅酶，γ?射線(xiàn)輻照，后處理，即得殼寡糖產(chǎn)品。采用天然提取，原料成本低，所得殼寡糖產(chǎn)品的分子量低，應用前景廣闊。

5    殼寡糖組合物及其制備方法和應用

殼寡糖為從數均分子量約為1000的殼寡糖COST中純化得到數均分子量約為628.5的殼寡糖COS46，其脫乙酰度約97.71％，產(chǎn)率約30％，COS46純度高達92.00％，組成中DP＝4的組分濃度為0.79mg/mL，含量為43.26％，DP＝5的組分濃度為0.41mg/mL，含量為22.34％，DP＝6的組分濃度為0.48mg/mL，含量為26.40％。本發(fā)明制備的殼寡糖COS46具有抗氧化性能，均能有效清除羥基自由基和DPPH自由基，能有效促進(jìn)Keap?1/Nrf2/HO?1內源性抗氧化通路激活，可顯著(zhù)抵御非酒精性急性肝損傷。

6    一種聚合度5~6殼寡糖的制備方法

以殼聚糖為原料，采用改良的蒸汽爆破反應器進(jìn)行爆破反應后，固液分離，固體通過(guò)復合酸水解、采用冰乙醇進(jìn)行沉淀、陽(yáng)離子交換樹(shù)脂吸附與解析附、活性炭脫色，微濾，酸性冷乙醇沉淀得聚合度5～6殼寡糖。本發(fā)明可以制備出聚合度5～6的高純度殼寡糖產(chǎn)品，產(chǎn)品收率高，副產(chǎn)物少，同時(shí)生產(chǎn)過(guò)程穩定，重復性好，操作簡(jiǎn)便可控，適用于聚合度5～6殼寡糖產(chǎn)品的批量化生產(chǎn)。

7    一種殼寡糖的制備裝置及其制備方法 

包括箱體，箱體的頂部上表面開(kāi)設有進(jìn)料口，箱體的底部開(kāi)設有出料口，進(jìn)料口的表面安裝有進(jìn)料閥，出料口的表面安裝有出料閥，箱體頂部上表面固定連接有電機座，電機座的表面固定安裝有攪拌裝置，攪拌裝置與箱體轉動(dòng)安裝，箱體的內壁靠近出料口的一端固定連接有固定環(huán)，固定環(huán)的表面沿中心對稱(chēng)固定連接有弧形凸起，本發(fā)明彈簧被壓縮產(chǎn)生的反作用力作用于轉動(dòng)塊的表面，使得圓柱能夠與固定環(huán)或者弧形凸起的表面緊貼，在升降柱轉動(dòng)的過(guò)程中，呈現往復性的上下移動(dòng)，進(jìn)一步保證攪拌混合的效果，同時(shí)提高了整體的制備效率。

8    全脫乙?；瘹す烟羌捌渲苽浞椒ê蛻?/strong>

該制備方法先將濃度為0.1％?0.2％殼寡糖溶液與氫型強酸性離子交換樹(shù)脂按體積比為1：(0.5?1)混合，攪拌吸附5h?10h；再向其加入稀鹽酸溶液，在60℃?80℃的條件下，加熱5h?10h；再加入氨水，攪拌解吸2h?5h，最后將得到的解吸液冷凍干燥，獲得全脫乙?；瘹す烟?。該制備方法操作簡(jiǎn)單、所用原料成本低，無(wú)需使用高濃度無(wú)機酸作為催化劑，降低了實(shí)驗的風(fēng)險性和對設備的損耗，是一種安全高效、綠色環(huán)保的制備方法；使用該制備方法制得的全脫乙?；瘹す烟钱a(chǎn)率較高，可廣泛的應用于抗菌、防腐、抗氧化方面。

9    一種貝萊斯芽孢桿菌復配殼寡糖發(fā)酵菌劑及其應用 

貝萊斯芽孢桿菌復配殼寡糖發(fā)酵菌劑，包括貝萊斯芽孢桿菌劑和殼聚糖，所述貝萊斯芽孢桿菌劑由貝萊斯芽孢桿菌（Bacillus velezensis）BF017002制成，貝萊斯芽孢桿菌（Bacillus velezensis）BF017002于2022年07月11日保藏于中國典型培養物保藏中心，保藏編號為：CCTCC NO:M20221086。本發(fā)明利用具有較強抑菌活性的貝萊斯芽孢桿菌BF017002，在前期發(fā)酵獲得的初始發(fā)酵菌液后，復配殼寡糖，繼續發(fā)酵3?5d，獲得復合發(fā)酵菌劑，該菌劑對番茄頸腐根腐病的防治效果達到80%以上。

10    一種β-環(huán)糊精包被殼寡糖及其制備方法

該制備方法是先向質(zhì)量百分比濃度為2.0％?5.0％的殼聚糖鹽酸鹽溶液中加入β?環(huán)糊精，使殼聚糖鹽酸鹽溶液與β?環(huán)糊精在混合液中的質(zhì)量百分比濃度比例為1:1；再加入殼聚糖酶，得到β?環(huán)糊精包被殼寡糖。該制備方法操作簡(jiǎn)單，風(fēng)險性低，所用藥品無(wú)毒無(wú)害，可以有效地抑制殼寡糖褐變，避免了現有技術(shù)中Mn2+對人體的傷害，適合大規模地應用于工業(yè)生產(chǎn)方面。并且使用該制備方法得到的β?環(huán)糊精包被殼寡糖色值低，產(chǎn)率較高，無(wú)毒無(wú)害，有效地解決了殼寡糖普遍純度低，品質(zhì)差，生物活性低的問(wèn)題。

11    一種助溶殼寡糖或殼聚糖的方法及速溶粉劑

助溶殼寡糖或殼聚糖的方法包括S1、按照設定比例量取易溶肥料、殼寡糖或殼聚糖原粉；S2、在密閉環(huán)境下，將步驟S1量取的易溶肥料與殼寡糖或殼聚糖原粉混合、攪拌均勻，形成速溶粉劑。易溶肥料與殼寡糖或殼聚糖原粉混合形成速溶粉劑，小分子的殼寡糖或殼聚糖粘附在易溶肥料顆粒的外側。速溶粉劑在水中溶解時(shí)，易溶肥料的分子在水中迅速由高濃度向低濃度擴散、稀釋?zhuān)瑤?dòng)粘附在其上的殼寡糖或殼聚糖分子一起由高濃度向低濃度擴散、稀釋?zhuān)_到助溶殼寡糖或殼聚糖的效果。

12    利用畢赤酵母工程菌產(chǎn)殼聚糖酶并制備殼寡糖的方法

該菌株經(jīng)發(fā)酵誘導產(chǎn)酶，獲得殼聚糖酶。該酶酶解90％脫乙酰度殼聚糖，得三糖～五糖為主的殼寡糖，均分子量約800；酶解70％脫乙酰度殼聚糖，得四糖以上的殼寡糖，均分子量約1800。本發(fā)明的畢赤酵母工程菌產(chǎn)殼聚糖酶活性高，可工業(yè)規模高效制備殼寡糖；同時(shí)針對不同脫乙酰殼聚糖底物可制備不同組分、不同均分子量的殼寡糖，可應用于不同領(lǐng)域。

13    一種以殼聚糖為輔助碳源來(lái)發(fā)酵黑曲霉并制備含殼寡糖的微生物菌劑及其制備方法 

該微生物菌劑中，黑曲霉的有效活菌數為2?20億/ml，殼寡糖含量為1?1.6％；在微生物菌劑的制備過(guò)程中，采用流加殼聚糖的方式向發(fā)酵液中加入殼聚糖液體，利用黑曲霉的代謝產(chǎn)物將殼聚糖酶解成殼寡糖，并以殼寡糖為輔助碳源進(jìn)行發(fā)酵，一方面降低殼聚糖酶解成本，另一方面降低培養過(guò)程中碳源的加入，降低發(fā)酵成本。本發(fā)明提供的微生物菌劑，能夠對作物產(chǎn)生促生作用。

14    一種雙途徑合成殼寡糖的全細胞及其生產(chǎn)方法 

通過(guò)過(guò)表達N?乙酰氨基葡萄糖轉運蛋白、N?乙酰氨基葡萄糖激酶、磷酸化N?乙酰氨基葡萄糖變位酶、幾丁質(zhì)合成酶、脫乙?；肝宸N酶蛋白，并結合胞內已知的UDP?N?乙酰氨基葡萄糖的合成途徑，組合構建了以葡萄糖和N?乙酰氨基葡萄糖為前體的雙途徑合成殼寡糖的全細胞。本發(fā)明的全細胞，可以生產(chǎn)聚合度可控(DP＆lt;10)、分子量均一(～1000Da)的殼寡糖。本發(fā)明采用全細胞生產(chǎn)的殼寡糖，最終獲得胞外殼寡糖的含量可達20g/L，純度較高，對于下游提取工藝降低了成本，同時(shí)全細胞生產(chǎn)方法具有過(guò)程簡(jiǎn)單、周期短、產(chǎn)量高等優(yōu)勢，工業(yè)化生產(chǎn)潛力明顯。

15    一種殼寡糖制備用酶解設備

包括罐體的內部設有攪拌機構，所述罐體的底端兩側均固定連接有底座，底座的上端面設有升降架，所述升降架上設有用于將攪拌機構吊起的升降機構，所述升降機構包括設于升降架內部?jì)蓚让娴碾妱?dòng)滑軌，兩個(gè)電動(dòng)滑軌上的活動(dòng)塊之間固定連接有升降桿，所述升降桿的底端中部設有與攪拌機構相連接的掛鉤；本實(shí)用新型通過(guò)設在減速電機頂端的吊環(huán)與設于升降架內部的升降機構，將減速電機底端連接的攪拌機構抽離出罐體內部，實(shí)現對攪拌裝置整體的拆卸控制。

16    一種殼寡糖穩態(tài)化制備方法  

步驟：將殼聚糖溶解到緩沖鹽溶液中，得到殼聚糖溶液；在所得的殼聚糖溶液中加入殼聚糖酶，進(jìn)行酶解反應；酶解結束后，酶解液迅速滅活，采用超濾膜預過(guò)濾；采用電滲?超濾一體膜技術(shù)精制，預過(guò)濾后的殼寡糖混合液在電場(chǎng)作用下，根據其不同的分子量和荷電性遷移，在回收室中得到除去緩沖鹽的窄分子量分布的殼寡糖溶液；濃縮干燥，得到殼二糖到殼五糖含量在80％以上的窄分布殼寡糖。與現有技術(shù)相比，本發(fā)明利用電滲?超濾一體膜技術(shù)去除了產(chǎn)品中夾帶的緩沖鹽，解決了殼寡糖產(chǎn)品褐變問(wèn)題，同時(shí)獲得殼二糖?殼五糖含量在80％以上的窄分布殼寡糖。

17    殼寡糖、解淀粉芽孢桿菌、香菇多糖的復配組合物及其在促進(jìn)黃瓜幼苗生長(cháng)中的應用

該復配組合物為液體形態(tài)，其中，所述殼寡糖的濃度為100?700mg/L，所述解淀粉芽孢桿菌的活菌數為105?108cfu/mL，所述香菇多糖的為400?1000倍香菇多糖稀釋液。該復配組合物能夠有效促進(jìn)黃瓜幼苗長(cháng)勢、根系發(fā)育及光合作用，其促進(jìn)效果明顯大于單獨施用殼寡糖溶液或解淀粉芽孢桿菌培養液或香菇多糖溶液的效果，同時(shí)也優(yōu)于殼寡糖溶液和解淀粉芽孢桿菌的復配，表現出明顯的協(xié)同增效作用。同時(shí)，該復配組合物對基質(zhì)土壤養分的改善也具有更顯著(zhù)的效果，并且能顯著(zhù)緩解低溫脅迫對黃瓜幼苗長(cháng)勢的危害，提升了黃瓜幼苗的低溫抗性。

18    一種殼寡糖-馬尾藻提取物反應物的制備方法和應用   

該制備方法包括水體預處理、原料溶解、添加馬尾藻提取物、靜止沉降、離心除雜和透析的步驟，包括：蒸餾水超聲脫氣1h，調整pH值為8～9；依次加入殼寡糖和馬尾藻提取物避光和室溫條件下緩慢攪拌至充分溶解；于4℃過(guò)夜靜止；冷凍高速離心，去除沉淀；上清液在去離子水中透析除雜，即得。本發(fā)明通過(guò)殼聚糖與馬尾藻提取物反應得到殼寡糖?馬尾藻提取物反應物，其可以通過(guò)抑制角質(zhì)形成細胞產(chǎn)生PEG2，從而減輕對皮下感受器的刺激達到舒緩功效，具有抗炎與舒緩作用，在醫用消炎領(lǐng)域具有潛在應用前景。

19    一種具有抗幽門(mén)螺旋桿菌的高含量殼寡糖的制備方法

步驟：1)單因素實(shí)驗確定最佳實(shí)驗參數：通過(guò)單因素實(shí)驗分析酶解溫度、復合酶配比以及反應pH因素對于反應產(chǎn)物殼寡糖含量的影響，確定最佳實(shí)驗參數；2)三因素三水平的參數實(shí)驗確立最佳酶解工藝參數：根據步驟1)確定的最佳實(shí)驗參數，依據Box?Behnken設計原則設計試驗，利用Design Expert軟件進(jìn)行數據分析，建立響應面回歸模擬方程，對試驗結果進(jìn)行預測分析，確立復合酶降解制備殼寡糖的最佳酶解工藝參數；3)采用高脫乙酰度殼聚糖為反應底物制備殼寡糖，應用最佳酶解工藝參數提高殼寡糖的含量，實(shí)現規?；到鈿ぞ厶?。

20    一種減少殼寡糖非酶褐變的生產(chǎn)工藝

主要基于殼寡糖在生產(chǎn)過(guò)程中，減少對氧氣的接觸，降低非酶褐變，通過(guò)在酶降解過(guò)程中通入保護氣減少氧氣的接觸以及在噴霧干燥過(guò)程中減少氧氣的接觸，從而減少殼寡糖的非酶褐變，生產(chǎn)的殼寡糖產(chǎn)品中的殼寡糖有效含量至少提高了6％。

21    一種含褐藻寡糖和殼寡糖的組合物及其制備方法和應用 

組成為：褐藻寡糖2wt％?10wt％，殼寡糖2wt％?10wt％，雙乙酸鈉0.1wt％?1wt％，咪唑啉5wt％?10wt％，PH值為5?8，溶劑為水。本發(fā)明組合物中加入的咪唑啉為兩性表面活性劑，助劑自身無(wú)毒，可將褐藻寡糖和殼寡糖混合在一起且不會(huì )產(chǎn)生絮凝現象。提供的組合物產(chǎn)品具有明顯的協(xié)同增效作用，既有促進(jìn)植物生根生長(cháng)的功能，也有增加植物自身抗病的能力。

22    一種含喹啉基團的殼寡糖季銨鹽衍生物及制備方法和應用 

含喹啉基團的殼寡糖季銨鹽衍生物及其制備方法和醫藥、功能食品保健、化妝品等領(lǐng)域中的應用。含喹啉基團的殼寡糖季銨鹽衍生物的結構如式一所示，優(yōu)點(diǎn)是將喹啉基團通過(guò)化學(xué)方法接枝到殼寡糖中，提高了殼寡糖的生物活性，制備過(guò)程簡(jiǎn)單，副反應少，且所用材料成本低。經(jīng)研究證明，衍生物水溶性良好，具有很好的抗氧化活性和抑菌活性，在醫藥、功能食品保健，特別是化妝品行業(yè)都有廣大應用價(jià)值。

23   制備殼寡糖的方法 

（1）取殼聚糖，在2.0～2.5 MPa的蒸汽壓力下爆破4分鐘后快速降壓，得到預處理的殼聚糖；

（2）向濃度為2%～10%的預處理的殼聚糖溶液中加入SEQ ID NO.1所示的殼聚糖酶CsnBUT，在50～58℃條件下孵育20～80小時(shí)，得到降解產(chǎn)物，降解產(chǎn)物中包括殼二糖、殼三糖和殼四糖，以殼三糖為主。殼寡糖的制備方法，可高效地降解殼聚糖，過(guò)程中不使用酸，綠色無(wú)污染；制備得到的殼寡糖中殼三糖的純度高，可大大減少寡糖精制過(guò)程后期產(chǎn)品分離純化的耗時(shí)和操作成本。本發(fā)明的方法可一步制備生產(chǎn)具有理想DP的COS，具有巨大的經(jīng)濟效益。

24    制備殼寡糖的方法、殼聚糖酶及其基因、酶制劑與應用  

制備殼寡糖的方法為：采用SEQIDNO.1所示的殼聚糖酶酶解殼聚糖或膠質(zhì)甲殼素生產(chǎn)殼寡糖，酶解條件為：pH4.0～8.0，溫度50～80℃。本發(fā)明的殼聚糖酶，其氨基酸序列如SEQIDNO.1所示，編碼該殼聚糖酶的基因如SEQIDNO.2所示。本發(fā)明的酶制劑，含有該殼聚糖酶。所述殼聚糖酶、酶制劑在降解殼聚糖或膠質(zhì)甲殼素中的應用，在制備殼寡糖中的應用。本發(fā)明采用特定的殼聚糖酶制備殼寡糖，催化活性高，可在高溫條件下進(jìn)行。本發(fā)明的殼聚糖酶可以在高溫條件下酶解殼聚糖，高效酶解殼聚糖制備殼寡糖。

25    多酚殼寡糖復合物及其制備方法和應用

步驟：(1)酶解或者發(fā)酵處理蕎麥麩皮；(2)乙醇提取步驟(1)處理的蕎麥麩皮多酚，所得多酚溶液以質(zhì)量比1:1?5與殼寡糖溶液混合，在振蕩器上振蕩離心后取上清冷凍干燥得到多酚殼寡糖復合物。本申請的多酚殼寡糖復合物通過(guò)對酶解處理前后蕎麥麩皮總酚含量和抗氧化活性測定得出，復合酶解大大提高了多酚溶出率和抗氧化活性。同時(shí)，通過(guò)對多酚、殼寡糖和多酚殼寡糖復合物抗氧化性測定得出，復合物抗氧化性顯著(zhù)提高。

26    一種制備高聚合度殼寡糖的方法  

向含有Mn＆lt;supgt;2+＆lt;/supgt;的殼聚糖溶液中加入殼聚糖酶或含有殼聚糖酶的溶液，進(jìn)行酶解，即得聚合度為3～6的殼寡糖；所述殼聚糖酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。所述含有殼聚糖酶的溶液通過(guò)以下方法制備得到：向發(fā)酵培養基中接種枯草芽孢桿菌，發(fā)酵，離心，即得。本發(fā)明的方法通過(guò)金屬離子與生物酶法耦合催化調節，可使酶解產(chǎn)物的聚合度由2～4改變?yōu)?～6。本發(fā)明所采用的殼聚糖酶，發(fā)酵產(chǎn)酶時(shí)間短，可以高效降解殼聚糖，10％濃度殼聚糖溶液6h轉化率可達85％以上，且加酶量?jì)H為2.5U/g殼聚糖。本發(fā)明所采用的枯草芽孢桿菌，產(chǎn)酶方式為胞外酶，培養菌體后將發(fā)酵液離心取上清液即可直接用于殼聚糖的降解。

27    一種單一高聚合度殼寡糖的制備方法  

步驟：將全脫乙?；臍す烟侨苡谒?，制成殼寡糖溶液，然后加入乙醇進(jìn)行沉淀，離心，收集沉淀；其中，加入乙醇的體積占最終溶液體積的比例為30?55％；將收集的沉淀用乙酸緩沖溶液溶解后，用填料為Bio?gel P10的凝膠排阻色譜柱進(jìn)行分離純化，洗脫液為乙酸緩沖溶液，通過(guò)示差折光檢測器檢測流出的洗脫液，收集檢測到的三個(gè)洗脫液組分；將所收集的三個(gè)洗脫液組分分別經(jīng)填料為Sephadex G10的凝膠排阻色譜柱進(jìn)行脫鹽，濃縮后即得到單一高聚合度殼寡糖。本發(fā)明所公開(kāi)的方法可制備純度高的殼八糖、殼九糖和殼十糖標準品，且制備方法簡(jiǎn)單可行。

28    殼寡糖及其制備方法  

步驟：（1）將酶分散液與活性炭混合，在預設溫度下溫育預設時(shí)間，得到活性碳固載酶分散液；（2）將殼聚糖分散于分散介質(zhì)中，得到殼聚糖分散液；（3）將所述殼聚糖分散液與所述活性炭固載酶分散液混合，反應得到殼寡糖；其中，所述酶分散液為第一酶與果膠酶的混合物分散于分散劑而得。相應的，本發(fā)明還公開(kāi)了一種由上述制備方法制備得到的殼寡糖。實(shí)施本發(fā)明，可簡(jiǎn)化酶固載工藝，提升酶回收利用效率，降低殼寡糖的生產(chǎn)成本。

29    殼寡糖的制備方法、殼寡糖以及殼寡糖保健品 

殼寡糖的制備方法包括如下步驟：配制含有殼聚糖、酸和雙氧水的混合反應物；將混合反應物置于高頻交變磁場(chǎng)內，第一次攪拌得到第一反應液；補充酸和雙氧水；接著(zhù)將第一反應液置于高頻交變磁場(chǎng)內，第二次攪拌得到第二反應液；分離提純，得到殼寡糖。這種殼寡糖的制備方法，通過(guò)在高頻交變磁場(chǎng)下攪拌含有殼聚糖、酸和雙氧水的混合反應物，通過(guò)混合反應物切割磁場(chǎng)形成電流，從而配合殼聚糖的化學(xué)降解。這種殼寡糖的制備方法降低了酸和雙氧水的用量，并且無(wú)需高壓電場(chǎng)，是一種環(huán)保且安全的殼寡糖的制備方法，具有極大的應用前景。

30    一種從蝦殼中提取殼寡糖的生產(chǎn)方法

依次包括搗碎、脫鈣、酶解除蛋白、酶解提糖、濃縮凍干等工藝制備殼寡糖。通過(guò)該方法，可以獲得與市售的食品級殼寡糖在純度及平均聚合度方面相似、抗氧化活性更高的殼寡糖。不僅有效利用了蝦加工的下腳料蝦殼等廢棄物，提高了蝦產(chǎn)品的加工附加值，而且減少了環(huán)境污染，工藝過(guò)程綠色、無(wú)污染，且生產(chǎn)設備簡(jiǎn)單、成本低，易于實(shí)現工業(yè)化生產(chǎn)，對于蝦產(chǎn)業(yè)的健康發(fā)展具有十分重要的意義。

31    一種殼寡糖單體的制備方法  

對殼寡糖溶液進(jìn)行預處理，使高濃度的殼寡糖溶液在80～90％乙醇溶液中分級沉淀，高聚合度殼寡糖被沉淀下來(lái)，小聚合度殼寡糖留存在上清液中，沉淀進(jìn)行第二次處理，兩次得到的上清液合并，旋轉蒸發(fā)濃縮，濃縮液冷凍干燥，得到聚合度1～5含量高的殼寡糖粗品。再進(jìn)行陽(yáng)離子交換色譜分離，采用階段性等度洗脫，一個(gè)洗脫液濃度只洗脫一個(gè)聚合度殼寡糖，實(shí)現分離過(guò)程無(wú)需檢測，得到殼寡糖單體的純度達到90％以上，產(chǎn)量達到克級別。

32    殼聚糖、殼寡糖在抑制蛋白質(zhì)吸收中的應用   

用于沉淀游離狀態(tài)的氨基酸和抑制蛋白質(zhì)的水解，以及由蛋白質(zhì)攝入和蛋白質(zhì)消化過(guò)程中引發(fā)的疾病。

33    一種膜分離工藝制備殼寡糖的方法

步驟：S1、選取適量動(dòng)物外殼原料，洗凈，其中動(dòng)物外殼包括蝦殼、蟹殼，應選取甲殼素含量較高的動(dòng)物外殼作為原料；S2、對動(dòng)物外殼原料進(jìn)行脫鈣、脫蛋白、脫乙?；幚?；S3、對經(jīng)步驟S2處理的原料進(jìn)行酶解處理，得到原液；S4、將原液導入超濾膜系統，進(jìn)行超濾膜過(guò)濾處理，得到處理液；S5、將處理液導入納濾膜系統，進(jìn)行納濾膜過(guò)濾，得到濃縮液和清液，清液導入反滲透膜系統進(jìn)一步過(guò)濾后，回收利用；S6、對步驟S5處理得到的濃縮液進(jìn)行干燥處理；本發(fā)明整體流程簡(jiǎn)單，成本低，生產(chǎn)效率高，通過(guò)超濾膜和納濾膜對原液進(jìn)行過(guò)濾，系統穩定性好，產(chǎn)品純度高。

34    一種高氨基含量殼寡糖的制備方法  

配制有機酸水溶液，pH＝3～5，緩慢加入殼聚糖固體，攪拌均勻后體系呈懸浮狀，殼聚糖的質(zhì)量百分濃度為8％～12％，超聲；利用40％氫氧化鈉溶液調節pH至5～7；加入木瓜蛋白酶和纖維素酶組成的復合酶，升溫至55±5℃，反應時(shí)間為5～8h；將所得溶液通過(guò)微濾膜，再通過(guò)納濾膜濃縮至濃度為15％～20％，所得溶液進(jìn)行噴霧干燥制得高氨基含量粉末狀殼寡糖產(chǎn)品。所得產(chǎn)品分子量分布較窄，殼寡糖氨基含量高，分子量可以達到3000Da以下。操作方便、安全經(jīng)濟、收率高、質(zhì)量可控、技術(shù)成熟，能夠比較有效地克服反應進(jìn)程中氨基脫落問(wèn)題，容易實(shí)現產(chǎn)業(yè)化。

35    制備甲殼寡糖的方法 

先將甲殼素進(jìn)行預處理得到納米甲殼素，然后用甲殼素酶SbChiAJ143酶水解納米甲殼素，制得甲殼寡糖；其中，所述甲殼素酶SbChiAJ143的氨基酸序列如SEQIDNO.1所示。所述將甲殼素進(jìn)行預處理得到納米甲殼素的方式為：使用研磨機對甲殼素水溶液進(jìn)行研磨。本發(fā)明的制備甲殼寡糖的方法，結合了物理研磨法和酶法，效率高。與單獨酶法水解膠質(zhì)甲殼素制備甲殼寡糖方法相比，甲殼素處理不使用任何化學(xué)試劑，節約了成本，簡(jiǎn)化了步驟，無(wú)環(huán)境污染。本發(fā)明的制備甲殼寡糖的方法，綠色、環(huán)保、高效，具有良好的工業(yè)應用潛質(zhì)。

36    一種殼寡糖的制備方法  

為將殼聚糖溶解后配制成殼聚糖溶液，調節pH值后加入殼聚糖進(jìn)行酶解；酶解得到的酶解液依次通過(guò)微濾除雜、超濾除雜、濃縮除鹽后收集濃縮液，最后將濃縮液冷凍干燥，得到殼寡糖。本發(fā)明的制備方法以60％以上的收率制備出分子量集中在1?3kDa的殼寡糖，制備的殼寡糖水溶性好、生物活性高，本發(fā)明的制備方法收率高，生產(chǎn)成本低，適于規?；a(chǎn)。

37    殼寡糖的制備方法 

該制備方法具體包括：(1)殼聚糖膠體化：將殼聚糖溶于酸溶液，得到膠體殼聚糖，加熱；(2)酶解：向膠體殼聚糖中加入復合酶A，升溫攪拌后加入復合酶B，恒溫攪拌，再加入殼聚糖酶，繼續攪拌得到殼聚糖酶解液；(3)分離：將殼聚糖酶解液經(jīng)離心、膜濃縮后，即得殼寡糖。上述制備方法能夠得到一種分子量分布窄、含量高的殼寡糖，進(jìn)而可將其更有效地應用于肥料、飼料以及農藥等領(lǐng)域中。

38    發(fā)酵法制備微生物源殼寡糖的方法

利用曲霉、地衣芽孢桿菌和乳酸菌進(jìn)行三菌混合發(fā)酵制備殼寡糖，具體包括下述步驟：(1)曲霉發(fā)酵；(2)地衣芽孢桿菌發(fā)酵；(3)乳酸菌發(fā)酵；(4)除渣除菌處理；(5)吸附處理；(6)醇沉干燥處理。本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)：(1)發(fā)酵法生產(chǎn)殼寡糖的工藝不受原料來(lái)源、季節的外界環(huán)境影響和限制，生產(chǎn)過(guò)程更加可控，產(chǎn)品品質(zhì)更穩定。(2)全程綠色生產(chǎn)，強酸強堿和發(fā)酵廢液排放較小，污染環(huán)境小，生產(chǎn)條件溫和，能耗低，符合國家節能減排政策。通過(guò)本發(fā)明的方法制備的微生物源殼寡糖，分子量分布較集中，最優(yōu)條件下殼五糖占比可達到92.3％。

39    殼聚糖酶及其突變體在制備殼寡糖中的應用 

所提供的突變體相比于出發(fā)殼聚糖酶具有更好的溫度耐受性和pH值應用范圍，從而使提供的殼聚糖酶突變體能應用于實(shí)際生產(chǎn)。本發(fā)明首先提供一種殼聚糖酶，其氨基酸序列為SEQIDNO:2；本發(fā)明再一個(gè)方面提供一種殼聚糖酶突變體，其氨基酸序列為SEQIDNO:4。本發(fā)明的殼聚糖酶突變體與出發(fā)蛋白酶相比具有更高的溫度耐受性與更高的催化效率，具有更好的工業(yè)應用前景。

40   含低分子殼寡糖的組合物、制劑及其應用 

組合物由低分子量殼寡糖、茉莉酸甲酯和二氫茉莉酸丙酯按重量比1?10:0.5?5:0.5?5組成，所述低分子量殼聚糖的平均分子量為1000?2000Da。1000?2000Da平均分子量的殼寡糖、茉莉酸甲酯和二氫茉莉酸丙酯可以協(xié)同增效，該分子段的殼寡糖通過(guò)作物特殊的茉莉酸信號通路，激活作物體內酶系活性，達到作物健壯與增產(chǎn)提質(zhì)的應用目的。

41    殼寡糖的制備方法及減肥片  

包括：S1)將殼聚糖在酸性水溶液中溶脹，然后加入殼聚糖酶，加熱進(jìn)行酶解，得到酶解液；S2)將所述酶解液經(jīng)滅酶處理、澄清處理后，得到數均分子量≤1Kda的液體殼寡糖。與現有技術(shù)相比，本發(fā)明采用生物酶解法制備數均分子量≤1Kda的殼寡糖，酶解結束后進(jìn)行了滅酶處理，沒(méi)有引入別的物質(zhì)，保證了產(chǎn)品的安全性，為制備天然類(lèi)物質(zhì)減肥產(chǎn)品提供了可靠原料。進(jìn)一步采用天然糖類(lèi)物質(zhì)殼寡糖(脫乙酰度≥90％、數均分子量≤1KDa)制備減肥片，在不影響食欲、無(wú)腹瀉的情況，具有增加脂質(zhì)的排泄量、改善血脂紊亂、減少脂肪組織增生，達到減肥降脂的效果，是首個(gè)天然糖類(lèi)減肥新原料。

42    微生物源殼寡糖的制備方法 

包括殼聚糖酶工程菌BC002菌體培養，殼聚糖溶液的制備，殼聚糖溶液酶解，殼聚糖溶液分離純化，殼聚糖溶液冷凍干燥等步驟。利用本發(fā)明提供的方法制備得到的殼寡糖的收率為43.20％，殼寡糖分子量范圍為986?1114Da，蛋白質(zhì)含量為0.015％、灰分含量為0.30％。制備的殼寡糖，分子量分布窄、純度高；對大腸桿菌與銅綠假單胞菌抑制效果好作用；細胞毒性低；擁有較好的抗敏、抗炎活性。

43    一種殼寡糖分離方法   

步驟1：取殼寡糖樣品加水配制成濃度為0.5?2mg/mL殼寡糖水溶液；步驟2：取鋁制點(diǎn)樣板，將殼寡糖水溶液點(diǎn)樣在鋁制點(diǎn)樣板的一端，然后將點(diǎn)樣后的鋁制點(diǎn)樣板置于裝有展開(kāi)劑的層析缸中，待溶劑前進(jìn)到鋁制點(diǎn)樣板的另一端后，往鋁制點(diǎn)樣板上噴灑顯色劑，噴灑完成后在40?60℃條件下烘烤至鋁制點(diǎn)樣板上的斑點(diǎn)顯色清晰即可。該分離方法簡(jiǎn)單，且分離效果佳，同時(shí)成本低廉，同時(shí)還可利用該方法對殼寡糖進(jìn)行鑒別。

44    微波-過(guò)氧化物耦合降解殼聚糖制備殼寡糖的方法 

以殼聚糖為原料，采用微波和過(guò)氧乙酸耦合降解方式，實(shí)現了殼寡糖的便捷、高效、經(jīng)濟及清潔制備。在適宜的條件下，殼寡糖產(chǎn)物的粘均分子量最低至1700，殼寡糖的收率最高達93.6%，過(guò)程具有工藝簡(jiǎn)單、反應條件溫和、產(chǎn)率高及過(guò)程清潔等顯著(zhù)特點(diǎn)，是一種具有工業(yè)化應用前景的殼寡糖制備技術(shù)。

45   聚合度為4-6的殼寡糖的制備方法

抑制脂肪吸收的聚合度為4?6的殼寡糖的制備工藝。通過(guò)角蛋白酶與β?葡聚糖酶的聯(lián)合應用，獲得了分子量分步均勻的聚合度為4?6的殼寡糖。本發(fā)明所述制備方法，大大縮短了酶解時(shí)間，平均產(chǎn)率高達87%。

46    農業(yè)用殼寡糖、肥料及其制備方法  

殼寡糖由殼聚糖在酸性環(huán)境中，經(jīng)溶菌酶酶解得到，將殼寡糖加入到肥料中，即得殼寡糖肥料，本申請制備的殼寡糖質(zhì)量穩定，配伍性好，施用于作物不會(huì )產(chǎn)生副作用。

47    特定聚合度的殼寡糖的制備方法

步驟：S1、殼聚糖提純；S2、制備殼聚糖溶液；S3、階段一水解：向殼聚糖溶液中加入非特異性酶，超聲反應0.5?1.5h，之后升溫滅活，中和，經(jīng)離心過(guò)濾得聚合度為65?115的低分子量殼聚糖溶液；S4、階段二水解：向低分子量殼聚糖溶液中加入葡聚糖酶，反應1?2h，之后升溫滅活，中和，經(jīng)離心過(guò)濾得聚合度為5?7的殼寡糖混合物溶液，經(jīng)分離、純化、干燥處理后得聚合度5?7的殼寡糖粉末。本發(fā)明先后采用對大分子親和力高的非特異性酶和對小分子親和力高的特異性酶?葡聚糖酶作用殼聚糖，使反應速度大大提高，酶解反應在3.5h內即可完成，極大提升生產(chǎn)效率。

48    一種殼寡糖組合物及其制備方法和應用

主要包括殼寡糖、抗氧化劑、滲透壓調節劑、pH調節劑等，其中殼寡糖由殼寡糖1000(COST)和殼寡糖3000(COSM)組成。本發(fā)明的組合物以注射劑的形式，制備工藝簡(jiǎn)便，便于工業(yè)化生產(chǎn)。本發(fā)明提供的殼寡糖組合物能夠顯著(zhù)降低對乙酰氨基酚誘導肝臟損傷時(shí)的ALT和AST的升高，能夠降低MDA和升高GSH含量，說(shuō)明COST和COSM能減少氧化型損傷，此外還可顯著(zhù)升高肝臟抗氧化酶的含量，包括SOD、GSH?Px、CAT，表明其能夠增加肝臟的抗氧化能力。

49    一種高濃度、低分子量液體殼寡糖的生產(chǎn)工藝    

解決了高濃度液體殼寡糖生產(chǎn)困難、高分子產(chǎn)品不易吸收、混配性差的問(wèn)題。其技術(shù)要點(diǎn)是：高濃度殼聚糖加酸溶脹，反應釜中增加通風(fēng)，輔助攪拌均勻，停風(fēng)、停攪拌靜置2?5h，然后加入過(guò)量特異性高酶活殼聚糖酶進(jìn)行酶解反應，同時(shí)進(jìn)行通風(fēng)，待粘度降至80mpa.s?100mpa.s時(shí)，開(kāi)啟攪拌，停止通風(fēng)，攪拌至反應結束。該工藝生產(chǎn)得到的液體殼寡糖含量可達到20?25％，遠超過(guò)現有市場(chǎng)上殼寡糖產(chǎn)品的正常生產(chǎn)濃度，分子量可控制在600?1500Da之間，被植物吸收利用后能更好的發(fā)揮其誘抗作用。該發(fā)明可大大降低生產(chǎn)能耗，節約生產(chǎn)成本，同時(shí)也降低了運輸費用等，更好的提高了生產(chǎn)效率。

50    一種含殼寡糖的肥料增效劑及其制備方法 

所述含殼寡糖的肥料增效劑，包括蝦皮、蟹殼下腳料65?75份、腐熟菌3?6份、碳源12?14份、氮源6?8份、植物生長(cháng)調節劑0.6?1.5份、中微量元素2?3份、水35?45份，本發(fā)明制得的增效劑能夠增加作物產(chǎn)量并提高抗病能力，采用微生物將原料分解，產(chǎn)生殼寡糖，生產(chǎn)過(guò)程能耗少、不污染環(huán)境，綠色環(huán)保，有效的利用蝦皮蟹殼等原料，極大程度的提高了廢物的利用率。

51    一種水溶性殼寡糖提純和濃縮的方法  

步驟：(1)將殼寡糖降解液通過(guò)陶瓷膜進(jìn)行預處理，去除降解液中的殼寡糖和其它不溶雜質(zhì)，得到陶瓷膜透過(guò)液；(2)采用超濾膜將陶瓷膜透過(guò)液進(jìn)一步提純，去除大分子多糖和其它雜質(zhì)，得到超濾透過(guò)液；(3)采用納濾膜對超濾透過(guò)液進(jìn)行濃縮?加水四級分離濃縮，去除無(wú)機鹽和單糖，得到殼寡糖納濾濃縮液；(4)對最終濃縮的殼寡糖濃縮液進(jìn)行噴霧干燥，得到高純度的殼寡糖粉末。工藝簡(jiǎn)單，過(guò)程無(wú)相變，能耗較低，易于工業(yè)化生產(chǎn)。該方法可提高殼寡糖的得率，得到高純度的平均分子量小于1000的殼二糖?殼六糖，得到的殼寡糖高純度、分子量分布窄，適用于制備符合醫藥級的殼寡糖產(chǎn)品。

52    一種用芳香醛修飾殼寡糖制備殼寡糖單體的方法 

該方法先將殼寡糖溶解并加入芳香醛修飾，然后上樣到大孔樹(shù)脂層析柱，用0?70%的乙醇水溶液梯度洗脫，同時(shí)采用紫外檢測器以波長(cháng)260?280nm在線(xiàn)監測芳香醛修飾殼寡糖單體的出峰情況，收集相應芳香醛修飾殼寡糖單體洗脫液，旋蒸除去乙醇，以稀鹽酸溶液調節pH為1.5?2.5，室溫攪拌充分釋放出游離芳香醛和殼寡糖單體，加入大孔樹(shù)脂吸附游離芳香醛，獲得殼寡糖單體溶液，旋蒸除去殘留的鹽酸，最后冷凍干燥，獲得可長(cháng)期保存的殼寡糖單體鹽酸鹽固體粉末。

53    提高免疫力的殼寡糖的制備工藝  

步驟：(1)(1)將殼聚糖和乙酸水溶液混合，攪拌得到殼聚糖溶液；(2)將殼聚糖溶液中加入過(guò)氧化氫水溶液，攪拌得到混合液，將混合液超聲后得到降解液；(3)將降解液減壓濃縮后加入質(zhì)量分數為80?95％的乙醇，攪拌，靜置，過(guò)濾，得到濾餅，濾餅用無(wú)水乙醇洗滌，干燥，得到殼寡糖；(4)將殼寡糖和水混合，加入多糖，再?lài)婌F干燥，得到所述提高免疫力的殼寡糖。本發(fā)明提高免疫力的殼寡糖的制備工藝，通過(guò)將化學(xué)降解法和物理降解法相結合，顯著(zhù)縮短了降解時(shí)間，并且殼聚糖降解完全，殼寡糖純度高，得到的提高免疫力的殼寡糖的穩定性和抗氧化活性好，并且具有顯著(zhù)的提升免疫力的作用。

54    低聚殼寡糖單體的制備方法 

對殼聚糖溶液進(jìn)行預處理，使殼聚糖溶液充分溶脹分散，擴大了酶與底物的接觸范圍，得到分布較為集中的殼寡糖產(chǎn)品，大大降低了單糖的生成。在制備殼寡糖的過(guò)程中與膜分離相結合，使活性殼寡糖及時(shí)得到分離，有效的控制了殼寡糖在酶作用下的進(jìn)一步降解。超濾之后納濾，除去低聚合度的無(wú)活性的寡糖和大量的水，使獲得生理活性高的某聚合度范圍內的殼寡糖產(chǎn)品。再進(jìn)行凝膠排阻色譜分離，將相同組分合并收集，冷凍干燥得殼寡糖單體，得到的低聚殼寡糖單體的純度達到40％以上。

55    一種超聲微波協(xié)同催化制備富硒殼寡糖的方法及應用   

通過(guò)以小分子殼寡糖為原料，在弱酸性的環(huán)境下加入亞硒酸鹽，邊加邊進(jìn)行機械攪拌，直到形成均勻透明粘稠狀混合物，持續機械攪拌1～30分鐘，將混合混合物放入超聲微波發(fā)生器中超聲1～45分鐘，得到除去空氣泡的均勻透明粘稠狀混合物，微波處理后，冷卻，用緩沖溶液溶液調節Ph至中性，冷凍干燥后即得富硒殼寡糖。本發(fā)明將傳統復雜的合成方法進(jìn)行創(chuàng )新，提高合成效率，整個(gè)過(guò)程無(wú)需引入生物化學(xué)類(lèi)催化劑，不會(huì )對環(huán)境產(chǎn)生污染，得到的富硒殼寡糖具有分子量小、無(wú)催化劑污染、綠色環(huán)保的優(yōu)勢，且制備方法簡(jiǎn)單高效，低成本，有利于工業(yè)化生產(chǎn)。

56    一種高效制備聚合度為2-6的殼寡糖的方法  

采用殼聚糖酶對殼聚糖進(jìn)行酶解，提供了一種生產(chǎn)周期較短、綠色環(huán)保的制備聚合度為2?6的殼寡糖方法；通過(guò)控制底物濃度、加酶量和反應時(shí)間，可將90.65％的底物徹底轉化為聚合度為2?6的殼寡糖，無(wú)需膜過(guò)濾及有機溶劑沉淀，并且對常見(jiàn)危害廣泛的植物病原菌有較好的抑制作用。

57    一種低聚殼寡糖及其制備方法   

原料：50份蝦蟹殼、20?30份鹽酸、5?7份濃硫酸、4?5份硝酸、5?8份硝酸、10?20份氫氧化鈉溶液和30?50份有機溶液。該低聚殼寡糖及其制備方法，首先在取材上，蝦蟹殼很容易得到，價(jià)格低廉，并且不要較為復雜的處理工藝，只需進(jìn)行簡(jiǎn)單的清洗和研磨即可，完全可以使用機器代替，不需要使用較多的人工進(jìn)行操作，極大的降低了人工成本，其次反應的環(huán)境也極易獲得，不需要較多的能源消耗，操作起來(lái)十分環(huán)保，極低的能源消耗進(jìn)一步的降低了成本，并且整個(gè)反應的時(shí)間較短，極大的提高了生產(chǎn)效率，從而提高了經(jīng)濟效益，從而達到了生產(chǎn)成本低的效果。

58    一種酶解和清潔氧化耦合降解殼聚糖制備殼寡糖的方法 

步驟：(1)稱(chēng)取殼聚糖配置成一定濃度的殼聚糖溶液，加入活化后的降解酶進(jìn)行酶解反應，得到初級殼聚糖降解液；(2)向初級殼聚糖降解液中加入過(guò)氧化氫溶液，進(jìn)行氧化降解反應，得到含殼寡糖的降解液；(3)將含殼寡糖的降解液自然冷卻到室溫后進(jìn)行過(guò)濾，除去未反應完全的固體殼聚糖原料，向濾液中加入無(wú)水乙醇進(jìn)行醇沉，將過(guò)濾分離出的殼寡糖，減壓干燥，得到殼寡糖。以殼聚糖為原料，采用酶解和氧化降解耦合技術(shù)，實(shí)現了殼寡糖的便捷、高效、經(jīng)濟及清潔制備，具有工藝簡(jiǎn)單、反應條件溫和、產(chǎn)率高及過(guò)程清潔等顯著(zhù)特點(diǎn)，是一種具有工業(yè)化應用前景的殼寡糖制備技術(shù)。

59    殼寡糖的制備方法及其制備系統  

步驟：酸解殼聚糖原料，形成膠體狀原料；以設定的添加比例，向所述膠體狀原料加入殼聚糖酶進(jìn)行酶解反應；使用預設孔徑的微濾膜對所述酶解反應后的膠體狀原料進(jìn)行過(guò)濾，獲得微濾產(chǎn)物；濃縮所述微濾產(chǎn)物，生成脫鹽濃縮液；干燥所述脫鹽濃縮液，制備獲得所述殼寡糖。該制備方法的反應條件溫和，不發(fā)生其他副反應，具有產(chǎn)品均一性好，產(chǎn)物聚合度適中，節能、高效并且無(wú)污染的優(yōu)點(diǎn)。同時(shí)，采用生物酶解法生產(chǎn)的殼寡糖具有分子量低、水溶性好、生物活性高、易被人體吸收等優(yōu)勢，是理想的殼聚糖降解方法。

60    一種堿性蛋白酶酶解法制備殼寡糖氨基酸液態(tài)肥的方法  

該方法包括將蝦蟹殼原料，經(jīng)粉碎機粉碎獲得蝦蟹殼粉；向所述蝦蟹殼粉中加入稀鹽酸進(jìn)行脫鈣處理，脫鈣處理完成后進(jìn)行過(guò)濾處理獲得沉淀物以及乙酸鈣液體；向所述沉淀物中加入水，攪拌混合均勻得到反應基料；調節所述反應基料的PH為5?7，加熱至50?60℃時(shí)加入堿性蛋白酶，保持該溫度進(jìn)行反應；反應完成后升溫蒸煮3.5?4.3小時(shí)后進(jìn)行固液分離。本申請提供的堿性蛋白酶酶解法制備殼寡糖氨基酸液態(tài)肥的方法，采用堿性蛋白酶對蝦蟹殼進(jìn)行分解，避免了傳統工藝的酸解分解法對蛋白質(zhì)生物效價(jià)的破壞，避免了濃酸濃堿液的使用，在縮短生產(chǎn)周期、降低生產(chǎn)成本的同時(shí)，減少了污染物產(chǎn)生。

61    一種酸降解和酶降解相結合高效制備殼寡糖的方法

首先將殼聚糖和酸溶液按照一定比例充分混合，在一定的溫度下密閉保溫一段時(shí)間，使殼聚糖初步降解得到重均分子量在7000～100000的中低分子量殼聚糖。然后加入適量的水溶解中低分子量殼聚糖，得到高濃度的殼聚糖溶液，并調節溶液的pH至4.2～6.0。最后加入適量的酶進(jìn)行酶解，經(jīng)適當的方法干燥后，即可得到重均分子量在400～4000的殼寡糖。本方法充分利用了殼聚糖酸降解和酶降解的各自?xún)?yōu)勢，采用酸降解得到的中低分子量殼聚糖作為酶降解反應的原料制備殼寡糖，規避了酸降解收率較低和酶降解效率較低的難題，大幅度提高了殼寡糖生產(chǎn)效率，為殼寡糖廣泛應用奠定良好的基礎。

62    一種高含量液體殼寡糖的生產(chǎn)方法  

解決了高濃度液體殼寡糖的生產(chǎn)技術(shù)問(wèn)題，其技術(shù)要點(diǎn)是：通過(guò)兩次溶脹、兩次酶解處理，即利用第一次酶解產(chǎn)物作為第二次溶脹的溶劑來(lái)進(jìn)行生產(chǎn)，同時(shí)，利用特異性殼聚糖酶控制產(chǎn)品的分子量，本發(fā)明生產(chǎn)的液體殼寡糖含量可達15％?18％，遠遠高于目前市場(chǎng)上各個(gè)生產(chǎn)廠(chǎng)家的產(chǎn)品濃度，所使用的特異性殼聚糖酶可有效地控制分子量在1000?3000Da。得到的產(chǎn)品可無(wú)需進(jìn)行常規的濃縮，直接進(jìn)行噴霧干燥得到固體產(chǎn)品，減少了設備、人力、物力等投入，降低生產(chǎn)能耗，從而大大降低生產(chǎn)成本，極大提高生產(chǎn)效率。

63    一種無(wú)酸殼寡糖的制備方法

包括以下步驟：將殼聚糖溶于鹽酸溶液，加入固定化酶進(jìn)行酶解，超聲波輔助酶解，得到酶解液；對酶解液依次進(jìn)行超濾膜分離、納濾膜分離，得到殼寡糖濃縮液；殼寡糖濃縮液通過(guò)陰離子交換柱；噴霧干燥，得到無(wú)酸殼寡糖，本發(fā)明將酶解法與酸解法相結合，輔以超聲波溶解，有效縮短酶解法的反應時(shí)間，降低生產(chǎn)成本，同時(shí)，陰離子交換柱使得殼寡糖中不含酸根離子，打破傳統殼寡糖的應用瓶頸，在食品、醫藥和化妝品領(lǐng)域有著(zhù)廣闊的應用前景，提高殼寡糖的產(chǎn)率，減少環(huán)境污染。

64    一種基于膜分離的殼寡糖制備方法 

步驟：(1)取1?20g的殼聚糖底物以纖維素酶降解，在一定條件下充分反應結束后，再將酶解后的溶液加熱煮沸一定時(shí)間，冷卻后離心除酶留取上清液備用；(2)取一定量反應后的殼聚糖上清液混合等量的甲醛，對混合液進(jìn)行攪拌后靜置一段時(shí)間；(3)觀(guān)察攪拌靜置后混合液的狀態(tài)，如渾濁，將液體過(guò)濾留下沉淀，以40?60％濃度的甲醛進(jìn)行清洗，完成后對其進(jìn)行正空干燥。本發(fā)明通過(guò)將膜分離手段與酶法制備殼寡糖復合，在對殼寡糖進(jìn)行制備的過(guò)程中進(jìn)行膜分離提純，該方法既降低了酶的消耗，提高了產(chǎn)品的質(zhì)量和純度，且大大降低了生產(chǎn)成本。

65    一種淀粉酶水解制備殼寡糖螯合硒的方法 

步驟：1)殼聚糖的溶解；2)硒酸鹽螯合反應；3)淀粉酶水解；4)殼寡糖螯合硒的純化；5)成品制備。本技術(shù)利用高分子量殼聚糖游離氨基螯合無(wú)機硒，進(jìn)一步通過(guò)淀粉酶水解方式制備低分子量殼寡糖螯合硒，該產(chǎn)品能通過(guò)作物葉片吸收，提高果蔬中硒含量，同時(shí)避免無(wú)機硒的毒性，對高品質(zhì)農業(yè)發(fā)展具有顯著(zhù)作用。

66    一種超臨界二氧化碳流體酶解制備殼寡糖的方法    

包括以下步驟：將殼聚糖溶液經(jīng)研磨處理，噴霧干燥，得到預處理的殼聚糖粉末；將海藻酸鈉溶液中加入戊二醛溶液中，室溫下攪拌，加入殼聚糖酶溶液，低溫攪拌交聯(lián)，得到固定殼聚糖酶的海藻酸鈉水溶膠，經(jīng)超聲波活化處理，得到活化的固定殼聚糖酶；將預處理的殼聚糖加入到超高壓反應釜中，加入活化的固定殼聚糖酶，通入二氧化碳氣體，加壓加熱使二氧化碳至超臨界狀態(tài)，繼續升溫至酶解溫度，酶解，得到殼寡糖。本發(fā)明將微米級殼聚糖粉末和交聯(lián)固定于海藻酸鈉水凝膠體系的殼聚糖酶作為原料，借助超臨界二氧化碳流體的超溶解性能，制備得到操作簡(jiǎn)便、效率高，分子量窄的殼寡糖。

67    一種基于高壓剪切效應的殼寡糖綠色制備工藝

其特征在于，將殼聚糖溶液加入高壓勻質(zhì)機中，采用循環(huán)勻質(zhì)模式，通過(guò)調整勻質(zhì)壓力、勻質(zhì)時(shí)間，即可將殼聚糖溶液降解成殼寡糖溶液。本工藝綠色無(wú)污染，不使用有毒害的有機試劑，零排放，所得產(chǎn)品殼寡糖相較現有酸解或酶解工藝色澤較淺，呈白色或黃白色，品質(zhì)較好。

68    一種用蝸牛酶制備殼寡糖的方法及其用途  

提供的用蝸牛酶制備殼寡糖的方法，對蝸牛酶酶解殼聚糖的酶解時(shí)間、酶解溫度、底物濃度、酶底質(zhì)量比等具體的工藝條件進(jìn)行探索和優(yōu)化，提高酶解效率，結合冷凍干燥法，保持了殼寡糖的性狀，便于產(chǎn)品的保存和進(jìn)一步使用，為蝸牛酶制備殼寡糖的大生產(chǎn)提供依據。本發(fā)明制得的殼寡糖還可以顯著(zhù)的改善特發(fā)性肺纖維化大鼠模型的纖維細胞活化，對特發(fā)性肺纖維化具有很好的改善作用，有利于特發(fā)性肺纖維化患者的康復。

69    一種復合酶制備的殼寡糖及其制備方法

提供的復合酶制備的殼寡糖，制備方法包括以下步驟：將殼聚糖溶于醋酸?醋酸鈉緩沖溶液中，然后在殼聚糖溶液中加入復合酶酶液酶解，酶解完成后，將所得到的酶解液過(guò)濾后采用透析法透析濾液，最后將所得透析液進(jìn)行濃縮干燥，即得。該殼寡糖分子量小，聚合度集中，產(chǎn)量高，更加適用于醫藥，食品，化妝品等領(lǐng)域，并且制備方法操作簡(jiǎn)便，原料成本低，具有良好的工業(yè)推廣性和實(shí)用性。

70    一種低分子量殼寡糖及其制備方法

包括將殼聚糖溶解于醋酸?醋酸鈉緩沖溶液中，配制殼聚糖溶液，向殼聚糖溶液中加入一種復合酶液酶解，酶解完成后采用透析法透析濾液，將所得透析液濃縮后進(jìn)行噴霧干燥等步驟。本發(fā)明提供制備方法具有低分子量殼寡糖產(chǎn)量高、條件簡(jiǎn)便、制備所需時(shí)間短，所用酶價(jià)廉易得，生產(chǎn)成本低等優(yōu)點(diǎn)，適于大范圍推廣應用。